Restauración de la respuesta celular citotóxica específica en la infección crónica por virus de la hepatitis C mediante la modulación de vías inductoras de anergia y apoptosis

Abstract

Antecedentes: Durante la infección por el virus de la hepatitis C (VHC) células citotóxicas VHC-específicas pierden sus funciones efectoras siendo incapaces de controlar la infección. Esta alteración podría estar relacionada con la expresión de PD-1 y CD127. La unión de PD-1 a su ligando, PD-L1 provoca la inducción de anergia en las células T específicas mientras que el déficit de CD127 provoca la inducción de un estado de apoptosis. Por lo que podría se que la infección por VHC module la expresión de estas dos moléculas para alterar la respuesta citotóxica específica y favorecer su supervivencia. Objectivos: Analizar las características cuantitativas y cualitativas de la respuesta citotóxica VHC específica. Material y Métodos: Analizamos sujetos HLA-A2+ divididos en dos grupos de acuerdo a grado de control de la infección por VHC. Separamos las células mononucleares de sangre periférica e intrahepática. Directamente ex vivo y tras estimulación antigénica analizamos la frecuencia de estas células específicas para 3 epítopos inmunodominantes del VHC utilizando moléculas pentaméricas. A continuación analizamos la expresión de PD-1 y CD127 y la capacidad de producción de IFN-[gamma] en estas células. Analizamos la capacidad de proliferación de estas células tras el bloqueo in vitro de rutas implicadas en anergia y apoptosis y secuenciamos dos epítopos del VHC. Resultados: La frecuencia de células VHC-específicas es similar y muy baja en los dos grupos de sujetos, sin embargo estas células están secuestradas en el compartimento intrahepático. La expresión de PD-1 y CD127 se correlaciona de manera positiva y negativa con la carga viral del VHC. La proliferación y la producción de IFN-[gamma] es mayor en los sujetos con infección resuelta que con infección persistente. En estos últimos encontramos una población de células con fenotipo PD1+/CD127+ que mantiene capacidad de proliferación, sin emabrgo en estos pacientes el VHC estaba mutado. La proliferación de las células VHC específicas aumenta tras el bloqueo de la vía PD-1/PD-L1 y de la apoptosis en pacientes con infección persistente. Conclusiones: la infección persistente por VHC altera la respuesta celular citotóxica específica favoreciendo un estado de anergia y pro-apoptótico mediante la modulación de la expresión de las moléculas PD-1 y CD127. La actuación farmacológica sobre las vías gobernadas por estas moléculas permite restablecer la respuesta citotóxica específica in-vitro en la infección crónica por VHC.