Efecto de la melatonina sobre la apoptosis y activación de la microglia en modelos experimentales de la infección por el virus de encefalitis equina venezolana

Abstract

El virus de la encefalitis equina venezolana (EEV) afecta el SNC en humanos y équidos provocando las encefalitis equinas. La melatonina (MLT) posee efecto protector ante las infecciones virales, y su influencia sobre la apoptosis y activación de la microglía ha aumentado su interés como factor en la patogénesis viral. El presente estudio pretende evaluar el efecto de la MLT sobre la apoptosis y activación de la microglia en modelos experimentales de la infección por EEV. Los ensayos in vivo fueron realizados con ratones machos albinos tratados con 500 [my]g MLT/Kg de peso e infectado con 10 dl50 del virus de EEV, siguiendo tres esquemas de tratamiento con MLT: preventivo y precoz, precoz, y tardío. Los animales se sacrificaron (n=5) a diferentes días post infección (P.I.) por cada grupo experimental. Se recolectó sangre completa, para determinación de igm anti EEV sérico. Y se les extrajo el cerebro para determinar la activación de la microglia utilizando anticuerpo monoclonal anti cd-200 de ratón, y se detectó apoptosis por túnel. Para los ensayos in vitro, se utilizaron células de neuroblastoma múrido (na2) tratadas con MLT (0,1mm; 0,5mm y 1,0mm), las cuales se infectaron con EEV (1x10-6 ufp/ml) por 2, 4 y 6 h, y posterior determinación de apoptosis por túnel. Se demostró que el tratamiento preventivo y mantenido con MLT así como el tratamiento precoz, logran un efecto benéfico en los ratones infectados por EEV con significativa reducción de la mortalidad al 7mo día de seguimiento. Ambas modalidades de tratamiento con MLT consiguen mantener un porcentaje significativo de supervivencia del 25%. Se demostró el efecto anti-apoptótico de la MLT en la infección por EEV, al observar al 5to día P.I. en los cerebros de ratones infectados por el virus un aumento en el número de células apoptóticas; y, disminución cuando fueron tratados con 500 [my]g/Kg de MLT. La MLT disminuyó la activación de la microglía en cerebro de ratones infectados por EEV, evidenciada por la expresión de anticuerpos anti- cd200. Se concluye, que la MLT posee un efecto terapéutico sobre la infección por EEV, cuya importancia clínica deberá establecerse en futuros trabajos.