RT info:eu-repo/semantics/doctoralThesis T1 Caracterización de los efectos de las vitaminas A y E sobre la neurotransmisión somatostatinérgica en el hipocampo de la rata A1 Hernández Pinto, Alberto Miguel K1 Vitamina A K1 Vitamina E K1 Transmisión nerviosa K1 Somatostatina K1 Hipocampo (Cerebro) K1 Bioquímica K1 Biochemistry K1 Ciencia K1 Science AB Las vitaminas A (VA) y E (VE) son moléculas liposolubles esenciales que participan en el mantenimiento de numerosas funciones vitales y cuyo déficit causa graves trastornos en el organismo. Sus funciones incluyen la regulación de la expresión génica, de la actividad enzimática o de diversas vías de transducción de señales. Además, la VA ha demostrado ser cofactor de ciertas proteínas mientras que la VE es un potente antioxidante capaz de eliminar radicales libres y especies reactivas de oxígeno (ERO). Recientes estudios han demostrado la implicación de estas vitaminas en el aprendizaje y la memoria, dos procesos asociados a la formación hipocampal. El tetradecapéptido somatostatina (SST), un neurotransmisor y neuromodulador, juega un papel importante en la regulación de los procesos cognitivos y la proliferación celular. Este péptido, a través de sus receptores específicos (SSTR), se acoplan negativamente a la adenilato ciclasa (AC) vía proteínas Gi, conduciendo a un descenso en los niveles de AMPc. Dichos receptores se encuentran también acoplados a las fosfotirosina fosfatasas (PTP), MAPK, fosfolipasas A2 y C o calcineurina, proteínas implicadas en la modulación de la plasticidad sináptica en el sistema nervioso central (SNC). En el momento actual se desconoce si el sistema somatostatinérgico está implicado en el mecanismo de acción de las vitaminas A y E. Sin embargo, el hecho de que ambas vitaminas liposolubles y el sistema somatostatinérgico regulen los procesos cognitivos y la supervivencia neuronal sugiere dicha posibilidad. Para evaluar esta hipótesis, centramos nuestro estudio en el hipocampo, ya que esta formación parece actuar como un almacén temporal de experiencias sensoriales y resulta fundamental en la formación de nuevos recuerdos. En este trabajo, caracterizamos los efectos que una deficiencia de VA o VE y un tratamiento con todo-trans-retinol (TTR) o ?-tocoferol tienen sobre distintos componentes del sistema somatostatinérgico y su posible implicación en la supervivencia neuronal. Para el modelo de deficiencia de VA se alimentó a ratas Sprague-Dawley (SD), machos, recién destetadas, con un pienso sin VA durante 12 semanas. Un grupo de estas ratas fue sacrificado por decapitación y el resto fueron tratadas con inyecciones intraperitoneales (i.p.) de TTR (150 ?g/kg) durante una semana más. Para el modelo de deficiencia de VE se alimentó a ratas SD, machos, de 15 semanas de edad, con un pienso sin VE durante 9 semanas. Un grupo de estas ratas fue sacrificado por decapitación y el resto fueron tratadas con inyecciones i.p. de ?-tocoferol (200 mg/kg) durante una semana. Se analizaron los niveles de SST inmunorreactiva (SST-IR) y la expresión del gen de la somatostatina; también se estudió la expresión proteica de la prohormona convertasa 2. Para evaluar el estado de los SSTR se analizaron los parámetros de unión de la 125I-Tyr11-SST a los SSTR, la expresión de los distintos subtipos de SSTR expresados en el hipocampo y los niveles de GRK2, GRK5 y GRK6. Posteriormente, se evaluaron dos sistemas efectores acoplados a los SSTR y que regulan los procesos cognitivos y la supervivencia celular, la AC y las PTP. Se analizó la expresión y funcionalidad de las proteínas Gi y la actividad de la AC basal y estimulada por forskolina (FK), así como la capacidad de la SST para inhibir dicha actividad; también se analizó la expresión proteica de los subtipos ACI, ACV/VI y ACVIII. Posteriormente, se evaluó la actividad PTP y la capacidad de la SST para estimular dicha actividad, así como la expresión proteica de dos PTP acopladas a los SSTR, SHP-1 y PTP?. Se analizó la funcionalidad de las defensas antioxidantes superóxido dismutasa (SOD) y catalasa (CAT), la peroxidación lipídica y los niveles de glutation en ratas con deficiencia de VA o tratadas con TTR. Por último, se evaluó la muerte celular en el hipocampo mediante la tinción TUNEL. En conclusión, los resultados de este trabajo demuestran por primera vez que la deficiencia de VA y la deficiencia de VE altera la neurotransmisión somatostatinérgica en el hipocampo de la rata adulta, sugiriendo que el sistema somatostatinérgico puede ser uno de los mecanismos por el cual ambas vitaminas regulan los procesos cognitivos y la supervivencia neuronal. YR 2009 FD 2009 LK http://hdl.handle.net/10017/5858 UL http://hdl.handle.net/10017/5858 LA spa NO Premio Extraordinario de Doctorado 2011 DS MINDS@UW RD 29-mar-2024