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dc.contributor.authorGarcía Soriano, Juan Carlos 
dc.contributor.authorLucio Ortega, Héctor Elessar de 
dc.contributor.authorJiménez Ruiz, Antonio 
dc.date.accessioned2022-02-09T16:17:50Z
dc.date.available2022-02-09T16:17:50Z
dc.date.issued2016
dc.identifier.bibliographicCitationGarcía Soriano, Juan Carlos; de Lucio Ortega, Héctor Elessar; Jiménez Ruíz, Antonio (2016) Puesta a punto de ensayos de cuantificación de dimerización y actividad de la superóxido dismutasa de hierro A de Leishmania infantum. Dianas 5 (2): e20160907. ISSN 1886-8746es_ES
dc.identifier.issn1886-8746
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10017/50656
dc.description.abstractLos parásitos del género Leishmania son los agentes causales de la leishmaniasis. Estos parásitos tienen la capacidad de sobrevivir dentro de las vacuolas fagocíticas de los macrófagos a pesar de las condiciones de pH y estrés oxidativo allí generadas. Esta resistencia se debe a diversos mecanismos biológicos que comprenden enzimas de detoxificación de las especies reactivas de oxígeno, entre otras. Estas enzimas son potenciales dianas terapéuticas para el tratamiento de la leishmaniasis. Una de estas enzimas es la superóxido dismutasa que cataliza la dismutación del anión superóxido, una especie reactiva de oxígeno con capacidad de originar otras especies reactivas más tóxicas. Leishmania cuenta con 4 superóxido dismutasas de hierro. La superóxido dismutasa de hierro A (Fe-SODA) se localiza en la mitocondria, lugar de producción endógena de superóxido. Se ha visto que la Fe-SODA se sobrexpresa en las formas parasitarias que infectan los macrófagos y que protege de la muerte celular inducida por el tratamiento con miltefosina. En este trabajo se ha clonado, expresado y purificado la Fe-SODA de Leishmania infantum con dos “etiquetas” (tags) moleculares distintas que permiten generar una versión heterodimérica para la puesta a punto de dos ensayos que permitan evaluar la eficacia de compuestos dirigidos contra la enzima. Uno de los ensayos que se ha optimizado en este trabajo ha sido un ensayo de cuantificación de la dimerización basado en la técnica ELISA usando anticuerpos contra las dos etiquetas del heterodímero, uno para pegar a la placa y el otro para evaluar el porcentaje de enzima dimérica. El segundo ensayo está dirigido a medir la actividad catalítica de la enzima. El ensayo de actividad se basa en la producción de superóxido por el sistema xantina/xantina oxidasa y en la competencia por el superóxido entre la Fe-SODA y el citocromo c, una proteína que cambia de color al reducirse por el superóxidoes_ES
dc.format.mimetypeapplication/pdfen
dc.language.isospaen
dc.publisherInnovARTE, Grupo Docente. Universidad de Alcaláes_ES
dc.rightsAttribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internacional*
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/*
dc.subjectLeishmania infantumla
dc.subjectSuperóxido dismutasaes_ES
dc.subjectActividades_ES
dc.subjectDimerizaciónes_ES
dc.subjectCitocromo ces_ES
dc.subjectELISAes_ES
dc.titlePuesta a punto de ensayos de cuantificación de dimerización y actividad de la superóxido dismutasa de hierro A de "Leishmania infantum"es_ES
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/articleen
dc.subject.ecienciaBiologíaes_ES
dc.subject.ecienciaBiologyen
dc.subject.ecienciaFarmaciaes_ES
dc.subject.ecienciaPharmacyen
dc.type.versioninfo:eu-repo/semantics/submittedVersionen
dc.rights.accessRightsinfo:eu-repo/semantics/openAccessen
dc.identifier.publicationtitleDianases
dc.identifier.publicationvolume5
dc.identifier.publicationlastpage9
dc.identifier.publicationissue2
dc.identifier.publicationfirstpage1


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