Papel de las proteínas oxidadas sobre el daño endotelial asociado a la enfermedad renal crónica : aproximación “in vivo” e “in vitro”

Abstract

Una manifestación temprana de las enfermedades cardiovasculares es la disfunción endotelial, asociada a un entorno inflamatorio propio de patologías crónicas como la insuficiencia renal crónica (IRC). Está descrito que en la IRC se producen modificaciones pos-traduccionales en las proteínas, tales como la oxidación, que serían capaces de generar un daño endotelial y como consecuencia producir eventos cardiovasculares asociados a esta patología (IRC). Por ello, nos centramos en caracterizar y determinar el papel de estas proteínas oxidadas presentes en los plasmas de pacientes con IRC. Además, valoramos los efectos de una proteína en concreto, albúmina humana, sobre cultivos endoteliales, para relacionar estas moléculas alteradas presentes en plasmas de sujetos patológicos y nuestra proteína modificada en cuanto a la capacidad de provocar fenómenos de daño y senescencia prematura inducida en el endotelio, con las consiguientes complicaciones fisiopatológicas. Se realizó una aproximación in vivo, en la cual, mediante técnica ELISA, se determinó la cantidad (ng/mL) de AOPP (Advance Oxidized Protein Products) en plasmas de sujetos (n=18) con IRC, procedentes del Hospital Puerta de Hierro, Majadahonda. Paralelamente, se cuantificó el número de micropartículas (MPs) endoteliales en las muestras para observar el daño endotelial.”In Vitro”, se utilizó Albúmina Humana Oxidada (mediante sulfato de cobre) como tratamiento, para ver los posibles efectos deletéreos de la misma, medidos como senescencia y daño (actividad B-gal, producción de MPs, reendotelización y proliferación). Se observó una mayor cantidad de proteínas oxidadas así como mayor número de MPs endoteliales en los plasmas de los sujetos respecto el control; se valoró que la presencia de albúmina oxidada induce senescencia prematura en el endotelio, así como expresión de mayor número de MPs e inhibición parcial de la proliferación y reendotelización del mismo, además de una mayor expresión de ciclina D1 a las 6 horas de tratamiento, proteína relacionada con la senescencia