La infección persistente por el virus de la hepatitis C (VHC) altera la reactividad de las células citotóxicas VHC específicas mediante el desequilibrio entre Mcl-1 y Bim debido a la disminución de la expresión de CD127

Abstract

Antecedentes: En la infección persistente por virus de la hepatitis C (VHC), la reactividad de los linfocitos T citotóxicos (LTC) se encuentra alterada y esto afecta al control del VHC. La expresión del receptor de la interleuquina-7 (CD127) en estas células podría regular la reactividad de los LTC a través de la modulación del equilibrio entre Bim/Mcl-1. Bim es una molécula proapotótica bloqueada por la acción de Mcl-1. La expresión de Bim/Mcl-1 y la reactividad de los LTC VHC-específicos se compararon en relación al fenotipo CD127. Material y Métodos: Se obtuvieron linfocitos de sangre periférica (LSP) de pacientes HLA-A2+ VHC+. Los LTC VHC-específicos se visualizaron mediante tinción de los LSP con Ac-anti CD8 y complejos pentaméricos HLAA2/péptido (pentámeros). El fenotipo Mcl-1/Bim/CD127/IFN-! en los LTC VHC-específicos se analizó mediante tinción de las células CD8+/pentámero+ detectables con Ac anti Mcl-1/Bim/CD127/IFN-!. La capacidad proliferativa invitro tras estimulación específica de los LTC VHC específicos se evalúo en presencia y ausencia del inhibidor z-VAD-fmk. Todas las células marcadas se analizaron mediante citometría de flujo. Resultados: Los LTC VHC-específicos con fenotipo CD127bajo se asociaron a elevada viremia del VHC, mientras que las células fenotipo CD127alto se correlacionaron con carga viral indetectable (P < 0.001). Directamente ex vivo, la frecuencia de células pentámero+ fue similar en los grupos con expresión alta y baja de CD127. Sin embargo, la capacidad prolierativa tras estimulación antígeno-específica se encontraba alterada en el grupo con expresión CD127bajo (P<0.05), aunque esto se corrigió mediante tratamiento con z-VAD-fmk (P<0.05). La expresión de Mcl-1 directamente ex vivo fue baja (P<0.01) y la expresión de Bim aumentó tras el encuentro antigénico en las células con fenotipo CD127bajo (P<0.05). La diferencia ex vivo entre la expresión de Mcl-1 y Bim en las células pentámero+ se correlacionó directamente con la expresión de CD127 (P<0.001) y con la reactividad de las células pentámero+ (P<0.05). La frecuencia de células productoras de IFN-! directamente ex vivo fue menor en las células CD127bajo que en las CD127alto (P<0.05). Conclusiones: Un expresión baja ex vivo de Mcl-1 y una sobre-expresión de Bim tras el encuentro antigénico se encuentran involucradas en la hiporeactividad de los LTC-VHC-específicos con baja expresión de CD127 durante la infección crónica, aunque esto puede ser superado mediante el bloqueo de la apoptosis.