Ánalisis de la respuesta inmunitaria inflamatoria en la inflamación por el virus dengue y su significancia clínica

Abstract

El dengue es una enfermedad viral, de carácter endemo-epidémico, es la arbovirosis de mayor relevancia a nivel mundial en términos de morbilidad, mortalidad y afectación económica. Las citoquinas y apoptosis juegan un papel importante en la respuesta inmunitaria contra el virus dengue (DENV); sin embargo su presencia en la forma grave de la enfermedad no está del todo esclarecida. El objetivo del presente estudio fue evaluar el patrón de citoquinas pro-inflamatorias/anti-inflamatorias y el marcador de apoptosis TRAIL en pacientes con dengue y su significancia clínica, con énfasis en sus fases evolutivas, severidad, serotipo viral y tipo de infección. Además, se analizó el efecto del DENV sobre la producción de citoquinas en cultivo de CMNSP y la apoptosis en monocitos de pacientes con dengue e infectados a diferentes días con los serotipos del virus dengue. Al respecto, se determinó la concentración de las citoquinas pro-inflamatorias (factor de necrosis tumoral-[alfa] [TNF[alfa]], Interleucina 6 [IL-6], IL-1[beta], IL-12 e IL-17; anti-inflamatorias (receptor 1 del TNF soluble [sTNF-RI], sTNF-RII y la proteína 1 tipo receptor de interleucina-1 [IL1RL1/sST2]); y el marcador de apoptosis ligando inductor de apoptosis relacionado al factor de necrosis tumoral [sTRAIL] en treinta pacientes con dengue en fase aguda (FA), fase de recuperación precoz (FRP) y fase de recuperación tardía (FRT). Estos pacientes fueron clasificados según la severidad de la enfermedad por los criterios de OMS en dengue sin signos de alarma (DSSA), dengue con signos de alarma (DCSA) y dengue grave (DG); y según el tipo de infección en infección primaria (IP) e infección secundaria (IS). Se incluyeron dos grupos controles, diez sujetos sanos (control) y ocho con otra infección viral febril (OIVF). Los niveles circulantes de las citoquinas se determinaron por ELISA y la apoptosis por el método de TUNEL. Los cultivos de CMNSP fueron estimulados o no con LPS por 24 horas. Los datos fueron analizados por ANOVA seguido por el post-test de Bonferroni. Nuestros resultados evidencian un incremento significativo de la mayoría de las citoquinas pro- y anti-inflamatorias (TNF[alfa], IL-6, IL-12, IL-17, sTNF-RI, sTNF-RII, IL1RL1/sST2) y de sTRAIL en el suero de los pacientes con dengue en fase aguda de la enfermedad con respecto al grupo control. El aumento de IL-6, sTNF-RI, sTNF-RII y IL1RL1/sST2 fue asociado con la severidad de la enfermedad; mientras que IL-12 no se alteró durante la enfermedad severa. El incremento de sTRAIL fue evidente en la infección primaria. El patrón de secreción de las citoquinas TNF[alfa], IL-1[beta] e IL-17 en los monocitos circulantes infectados fue similar al comparar las concentraciones con las del grupo control sin estimulo. Asimismo, los niveles de IL-6 e IL-12 cursaron parecidas al grupo control. Los monocitos de pacientes con dengue sin LPS presentaron un aumento de las células apoptóticas (p<0,001) con respecto al control. Este incremento de las citoquinas y la apoptosis durante la enfermedad evidencia la participación del DENV en la activación y muerte del monocito in vivo.