%0 Journal Article 
%A Xu, Dongsheng
%T New monolithic chiral stationary phases for enantioseparation using Nano-LC: preparation and applications
%D 2019
%U http://hdl.handle.net/10017/45227
%X Las separaciones quirales constituyen un tema de gran interés en la actualidad debido a su alto impacto en diferentes campos como el farmacéutico, agroquímico o alimentario, entre otros. Por ello, el desarrollo de nuevas fases estacionarias quirales que permitan obtener tiempos de análisis reducidos y altas eficacias, y trabajar en distintos modos de separación, presenta un gran interés. Las columnas monolíticas han atraído un interés creciente en los últimos años debido al amplio intervalo de pH en el que pueden trabajar, las bajas presiones que se obtienen a altos flujos, la alta eficacia y sensibilidad que proporcionan, el bajo consumo de disolventes y su fácil acoplamiento a Espectrometría de Masas. Las columnas monolíticas quirales pueden dividirse en tres categorías de acuerdo a los materiales en los que se basan: columnas monolíticas basadas en sílice, columnas monolíticas basadas en polímeros y columnas monolíticas híbridas orgánico-sílices.
Aunque existen muchas posibilidades para llevar a cabo con éxito una separación quiral, las técnicas de micro-separación juegan un papel crucial. Entre las distintas estrategias miniaturizadas para llevar a cabo separaciones quirales, el empleo de columnas quirales en nano-cromatografía de liquidos (nano-LC) o electrocromatografía capilar (CEC) ha atraído mucho interés. En comparación con HPLC convencional, nano-LC no solo puede disminuir considerablemente el consumo de disolventes, muestras y residuos, sino que permite también obtener mayores eficacias de separación, buena resolución y tiempos de análisis más cortos. El objetivo de esta Tesis Doctoral ha sido el desarrollo de columnas monolíticas quirales, su evaluación y su aplicación en nano-LC. Para ello, se han empleado tres selectores quirales como la vancomicina, teicoplanina y O-[2-(metacriloiloxi)-etilcarbamoil]-10,11-dihidroquinidina (MQD) para la preparación de las columnas monolíticas.
Con el fin de reducir el tiempo asociado a la fabricación de columnas monolíticas basadas en polímeros orgánicos funcionalizados con vancomicina y reducir la complejidad de su preparación, en esta Tesis Doctoral se ha desarrollado una aproximación de co-polimerización basada en un solo paso. Con este fin, el derivado 2-isocianatoetil metacrilato (ICNEML) de vancomicina (ICNEML-vancomicina) se sintetizó y a continuación se co-polimerizó con el agente entrecruzante y el iniciador en un sistema porogénico binario para preparar la columna monolítica polimérica funcionalizada con vancomicina (poli(ICNEML-vancomicina-co-EDMA)). Las condiciones de polimerización se optimizaron sistemáticamente para obtener permeabilidad, eficacia de columna y resolución enantiomérica satisfactorias. La capacidad de enantioresolución de la columna monolítica optimizada se evaluó analizando una serie de fármacos quirales en los modos de fase polar orgánica y fase reversa. Asimismo, se seleccionaron las condiciones más adecuadas para llevar a cabo las separaciones enantioméricas incluyendo el tipo y concentración del disolvente orgánico, la concentración de la disolución reguladora y pH de la fase móvil, siguiendo un cuidadoso proceso de optimización.
En esta Tesis Doctoral también se ha preparado una columna monolítica híbrida orgánico-sílice funcionalizada con teicoplanina mezclando el monómero de copolimerización teicoplanina-2-isocianatoetil metacrilato (Tei-ICNEML) y el iniciador en la disolución de hidrólisis de tetrametil ortosilicato (TMOS) and 3-(trimetoxisilil)-propilmetacrilato (γ-MAPS). Las condiciones de preparación y separación se optimizaron de forma sistemática y la columna monolítica óptima se aplicó a la separación enantiomérica de compuestos quirales en los modos de fase polar orgánica (POM) y de fase inversa (RPM).
Con el fin de preparar una columna monolítica híbrida orgánico-sílice funcionalizada con quinidina, en esta Tesis Doctoral se seleccionaron derivados de quinidina (MQD) como selectores quirales para la preparación de dichas columnas mediante una estrategia fácil de un solo paso. Se evaluó el efecto de la composición de la fase móvil en la columna monolítica híbrida MQD-sílice optimizada en los modos de fase polar orgánica y fase reversa y se llevó a cabo la separación enantiomérica de un total de 52 aminoácidos proteicos y no proteicos N-derivatizados en los dos modos de separación. Asimismo, la columna monolítica híbrida MQD-sílice desarrollada se aplicó a la separación de aminoácidos proteicos y no proteicos por nano-LC. Con el fin de obtener una capacidad de enantioresolución satisfactoria, se investigaron distintos agentes derivatizantes y se optimizaron las condiciones cromatográficas. Se analizaron 27 aminoácidos, 19 proteicos y 8 no proteicos utilizando FMOC como agente derivatizante, se evaluaron las características analíticas del método desarrollado y se aplicó a la determinación de dos L-aminoácidos en suplementos dietéticos.
%K Análisis Cromatográfico
%K Aminoácidos
%K Química
%K Chemistry
%~ Biblioteca Universidad de Alcala